Proliferação Celular em Gestações Naturais e de Conceptos Bovinos Transgênicos Clonados, que Expressam Proteína Fluorescente Verde / Cell proliferation in pregnancies natural and transgenic conceptos cattle cloned, expressing green fluorescent protein
DOI:
https://doi.org/10.34117/bjdv5n12-381Keywords:
clonagem, placenta, prenhez, ruminantes, transgenia.Abstract
Neste estudo, foi avaliada a ocorrência de proliferação celular em placentônios de conceptos bovinos transgênicos clonados e de inseminação artificial, nos períodos de 60 e 90 dias de gestação. As amostras foram recortadas e fixadas em solução de paraformoldeído a 4% em tampão fosfato de sódio a 0,1M pH 7.4, para realização da técnica de imuno-histoquímica. Os resultados obtidos foram comparados entre bovinos clonados transgênicos e de inseminação artificial. Em todos os grupos e períodos gestacionais, o epitélio fetal apresentou marcação positiva para proliferação celular. Aos 60 dias a marcação positiva no epitélio uterino das gestações manipuladas foi pouco evidente em relação às de gestações naturais. Por sua vez aos 90 dias a imunorreatividade dos placentônios dos conceptos clonados, foi intensa não só no epitélio mas também no tecido conjuntivo fetal, fato não observado na gestação natural, onde a reação positiva foi pouco evidente no tecido conjuntivo fetal. Neste estudo foi demonstrado possível desequilíbrio nos padrões de proliferação celular nos conceptos bovinos clonados transgênicos, pois aos 60 dias, apresentaram menor atividade proliferativa e aos 90 dias aumento. Desse modo os resultados são importantes para a compreensão de possíveis falhas no desenvolvimento gestacional em técnicas avançadas de manipulação embrionárias.References
BERTOLINI, M.; BERTOLINI, L.R.; GERGER, R.P.C.; BATCHELDER, C.A.; ANDERSON, G.B. Developmental problems during pregnancy after in vitro embryo manipulations. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.31, p.391-405, 2007.
BORDIGNON, V.; SMITH, L. C. Clonagem animal por transferência nuclear. In: GONÇALVES, P. B. D.; FIGUEIREDO JR; FREITAS, V. J. F. Biotécnicas aplicadas à reprodução animal. 3.ed. São Paulo: Rocca, 2008. p.347-364.
BOSS, A.; JANSSEN, J.; MULLING, C. Proliferation and apoptosis in bovine placentomas during pregnancy and around induced and spontaneous parturition as well as in cows retaining the fetal membranes. Reproduction, v.126, p.469-480, 2003.
BOOS, A.; STELLJES, A. Immunohistochemical detection of collagen types I, III and IV in the bovine uterus during pregnancy. Reproduction in Domestic Animals, v.35, p.174-175, 2000.
CARVALHO, A. F.; KLISCH, K.; MIGLINO, M.A.; PEREIRA, F.T.V.; BEVILACQUA, E. Binucleate trophoblast giant cells in the water buffalo (Bubalus bubalis) placenta. Journal of Morphology, v.267, n.1, p.50-56, 2006.
FACCIOTTI, P.R.; RICI, R.E.G; MARIA, D.A.; BERTOLINI, M.; AMBRÓSIO, C.E.; MIGLINO, M.A. Patterns of cell proliferation and apoptosis by topographic region in normal Bos taurus vs. Bos indicus crossbreeds bovine placentae during pregnancy. Reproductive Biology Endocrinology, v.7, n.25, 2009.
JUNQUEIRA, L. C.; CARNEIRO, J. Biologia celular e molecular. 7.ed. Rio de Janeiro: Ed. Guanabara Koogan, 2000. p. 209-217.
MIGLINO, M. A.; PEREIRA, F.T.V.; VISINTIN, J.A.; GARCIA, J.M.; MEIRELLES, F.V.; RUMPF, R.; AMBRÓSIO,C.E.; PAPA,P.C.; SANTOS, T.C.; CARVALHO, A.F.; LEISER,R.; CARTER, A.M. Placentation in cloned cattle: structure and microvascular architecture. Theriogenology, v.68, n.4, p.604-617, 2007.
MOSSMAN, H.W. Comparative morphogenesis of the fetal membranes and accessory uterine structures. Carnegie Inst. Washington Publ. 479. Contributions to Embryology, v.26, p.129-246, 1937.
OLIVEIRA, M. F.; CARTER, A. M.; BONATELLI, M.; AMBRÓSIO, C. E.; MIGLINO, M. A. Placentation in the rock cavy, Kerodonrupestris (Wied). Placenta, v. 27, n.1, p. 87-97, 2006.
PEREIRA, A.F.; FREITAS, V.J.F. Clonagem em ruminantes: progressos e perspectivas atuais. Revista Brasileira de Reprodução Animal, Belo Horizonte, v.33, n.3, p.118-128, 2009.
PEREIRA, F.T.V. Eritrofagocitose placentária em búfalas (Bubalus bubalis bubalis Simpson, 1945). 2004. 102p. Tese (Doutorado em Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres) – Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade São Paulo, São Paulo.
PEREIRA, F.T.V.; OLIVEIRA, L.J.; BARRETO, R.S.N.; MESS, A.; PERECIN, F.; BRESSAN, F.F.; MESQUITA, L.G.; MIGLINO, M.A.; PIMENTEL, J.R.V.; FANTINATO NETO, P.; MEIRELLES, F.V. Fetal-maternal interactions in the synepitheliochorial placenta using the eGFP cloned cattle model. PLoS One, v.8, n.5, 2013.
PFARRER, C.; WEISE, S.; BERISHA, B.; SCHAMS, D.; LEISES, R.; HOFFMANN, B.; SCHULER, G. Fibroblast growth factor (FGF) -1, FGF2, FGF7 and FGF receptors are uniformly expressed in trophoblast giant cells during restricted trophoblast invasion in cows. Placenta, v.27, p.758-770, 2006.
RICI, R.E.G.; FACCIOTTI, P.R.; AMBRÓSIO, C.E.; MARIA, D.A.; KFOURY, J.R.; BERTOLINI, M.; MIGLINO, M.A. Cell cycle and apoptosis in normal and cloned bovine near-term placentae. Animal Reproduction Science, V. 115, p. 29-38, 2009.
RICI, R.E.G.; FACCIOTTI, P.R.; MARIA, D.A.; FERNANDES, V.M.; AMBRÓSIO, C.E.; MIGLINO, M.A. Evaluation of the contribution of the placentomal fusion during gestation in cattle. Animal Reproduction Science, v. 126, p.143-150, 2011.
TRERÈ, D. AgNOR staining and quantification. Micron, v. 31, p. 27-131, 2000.
YAMAUCHI, N.; TAKEZAWA, T.; KIZAKI, K.; HERATH, C.B.; HASHIZUME, K. Proliferative potencial of endometrial stromal cells, and endometrial and placental expression of cyclin in the Bovine. Journal of Reproduction and Development, v.49, n.6, p. 553-560, 2003.

