Própolis verde brasileira: citotoxicidade e potencial anti-inflamatório in vitro
Brazilian green propolis: cytotoxicity and anti-inflammatory potential in vitro
DOI:
https://doi.org/10.34117/bjdv8n11-394Keywords:
abelhas africanizadas, vassourinha, fagocitose, compostos fenólicos, saponinasAbstract
A manutenção prolongada de uma resposta inflamatória eleva o risco de desenvolvimento de um processo crônico, bem como, promove a ocorrência de dano tecidual severo. A propólis verde, produzida a partir de exsudatos coletados pelas abelhas africanizadas de uma planta nativa do Brasil, detém de composição fitoquímica as quais são responsáveis por atividades biológicas benéficas ao organismo no combate e prevenção de doenças. Diante do cenário da busca por compostos terapêuticos com capacidade anti-inflamatória segura e eficiente, este estudo teve como objetivo investigar in vitro o potencial anti-inflamatório e citotóxico do extrato da própolis verde (EPV). Para tanto, realizou-se a análise fitoquímica por meio da quantificação de flavonoides, taninos condensados, taninos hidrolisados e saponinas. A análise de citotoxicidade foi realizada por meio do ensaio do MTT, e os ensaios de fagocitose e espraiamento de macrófagos para a análise da atividade anti-inflamatória. Observou-se que o EPV possui elevados teores de flavonoides (7.2 ± 0.48 em g EQ/100g), taninos condensados (32.28 ± 9.5 em g EP/100g), taninos hidrolisados (67.87 ± 10.04 em g EAG/100g) e saponinas (71.31 ± 7.9 em g ES/100g). A ausência de citotoxicidade foi constatada em todos os tempos de avaliação por meio do cálculo da concentração citotóxica de 50% (CC50). Os valores obtidos de CC50 foram: tempo de 24 h - 2393 ug/mL, tempo de 48 h – 8665 ug/mL e no tempo de 72 h – 6027 ug/mL. Nas análises anti-inflamatórias in vitro, os tratamentos promoveram inibições de 92 a 100% nas concentrações de 200, 500 e 1000 µg/mL, tanto no teste de espraiamento como no de fagocitose. A partir dos resultados obtidos, é possível concluir que a ausência de citotoxicidade e atividade anti-inflamatória do EPV podem ser comprovadas por estudos in vitro, e que, provavelmente, além dos compostos fenólicos, as saponinas estejam respondendo por essa importante atividade terapêutica.
References
ANANTHI, T.; CHITRA, M. Screening of invitro anti-inflammatory activity of Michelia champaca Linn. Flowers. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, p. 71–72, 2013.
Araújo, A. B. C.; Dias, A. J. S.; Freitas, R. L. S.; Nunes, A. R.;Silva, G. A.; Santos, D. C. Prospecção Química e Avaliação da Atividade Biológica da Própolis de Salinópolis, Pará.Rev. Virtual Quim., 12 (2), 00-00, 2020.
ApisFlora. Processo de obtenção do extrato padronizado de própolis, extrato assim obtido, suas formulações, produtos e usos". Depósito de patente sob o número PI0405483-0, publicado na Revista de Propriedade Industrial n. 1778, de 01/02/2005.
AUGUSTO-OBARA, T. R. et al. Benefits of superfine grinding method on antioxidant and antifungal characteristic of Brazilian green propolis extract. Scientia Agricola, v. 76, p. 398–404, 2019.
AZEDO, M. R. et al. Functional evaluation of monocytes in cattle naturally infected with the bovine leucosis virus. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 63, p. 1131–1140, 2011.
BACCHI, S. et al. Clinical pharmacology of non-steroidal anti-inflammatory drugs: a review. Anti-Inflammatory & Anti-Allergy Agents in Medicinal Chemistry, v. 11, n. 1, p. 52–64, 2012.
BARBA-OSTRIA, C. et al. Evaluation of Biological Activity of Natural Compounds: Current Trends and Methods. Molecules, v. 27, n. 14, p. 4490, jan. 2022.
BASTOS, C. R. et al. Viabilidade celular, fagocitose e espraiamento de fagócitos mononucleares, e liberação de peróxido de hidrogênio por leucócitos de glândulas mamárias bovinas sadias e infectadas. Pesquisa Veterinária Brasileira, v. 32, p. 850–854, set. 2012.
BERTOLINI, A.; OTTANI, A.; SANDRINI, M. Selective COX-2 inhibitors and dual acting anti-inflammatory drugs: critical remarks. Current Medicinal Chemistry, v. 9, n. 10, p. 1033–1043, maio 2002.
BONIAKOWSKI, A. E. et al. Macrophage-Mediated Inflammation in Normal and Diabetic Wound Healing. Journal of Immunology (Baltimore, Md.: 1950), v. 199, n. 1, p. 17–24, 1 jul. 2017.
BRANCATO, S. K.; ALBINA, J. E. Wound macrophages as key regulators of repair: origin, phenotype, and function. The American Journal of Pathology, v. 178, n. 1, p. 19–25, jan. 2011.
EL-BELTAGI, H. S. et al. Physical Characteristics, Mineral Content, and Antioxidant and Antibacterial Activities of Punica granatum or Citrus sinensis Peel Extracts and Their Applications to Improve Cake Quality. Plants, v. 11, n. 13, p. 1740, jan. 2022.
FRIEDMAN, M.; KLEIN, T. W.; FRIEDMAN, H. Legionella pneumophila-induced suppression of macrophage spreading in vitro. Infection and Immunity, v. 42, n. 1, p. 421–423, out. 1983.
GANESH, G. V.; RAMKUMAR, K. M. Macrophage mediation in normal and diabetic wound healing responses. Inflammation Research, v. 69, n. 4, p. 347–363, 1 abr. 2020.
GIERLIKOWSKA, B. et al. Phagocytosis, Degranulation and Extracellular Traps Release by Neutrophils—The Current Knowledge, Pharmacological Modulation and Future Prospects. Frontiers in Pharmacology, v. 12, 2021.
GUO, S.; DIPIETRO, L. A. Factors affecting wound healing. Journal of Dental Research, v. 89, n. 3, p. 219–229, mar. 2010.
HARUN, N. H.; SEPTAMA, A. W.; JANTAN, I. Immunomodulatory effects of selected Malaysian plants on the CD18/11a expression and phagocytosis activities of leukocytes. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine, v. 5, n. 1, p. 48–53, 1 jan. 2015.
ISO. 10993–5: 2009 Biological Evaluation of Medical Devices–Part 5: Tests for in Vitro Cytotoxicity. International Organization for Standardization, Geneva, 2009.
JUANG, Y.P.; LIANG, P.H. Biological and Pharmacological Effects of Synthetic Saponins. Molecules., v.27, s.25, n.21, p.4974, 2020. doi: 10.3390/molecules25214974.
JOFFE, A. M.; BAKALAR, M. H.; FLETCHER, D. A. Macrophage phagocytosis assay with reconstituted target particles. Nature Protocols, v. 15, n. 7, p. 2230–2246, jul. 2020.
KADUŠEVIČIUS, E. Novel Applications of NSAIDs: Insight and Future Perspectives in Cardiovascular, Neurodegenerative, Diabetes and Cancer Disease Therapy. International Journal of Molecular Sciences, v. 22, n. 12, p. 6637, jan. 2021.
KIENZL, M.; KARGL, J.; SCHICHO, R. The Immune Endocannabinoid System of the Tumor Microenvironment. International Journal of Molecular Sciences, v. 21, n. 23, p. 8929, jan. 2020.
KOBIELAK, A.; BODDUPALLY, K. Junctions and Inflammation in the Skin. Cell Communication & Adhesion, v. 21, n. 3, p. 141–147, 1 jun. 2014.
KOH, T. J.; DIPIETRO, L. A. Inflammation and wound healing: the role of the macrophage. Expert Reviews in Molecular Medicine, v. 13, p. e23, 11 jul. 2011.
LI, Z.; BRATLIE, K. M. Macrophage Phenotypic Changes on FN-Coated Physical Gradient Hydrogels. ACS Applied Bio Materials, 25 ago. 2021.
LIMA, D. R. F. DE et al. Avaliação das propriedades e potencialidades da própolis verde e sua fonte botânica Baccharis dracunculifolia. Revista Tecnologia e Tendências, v. 10, n. 2, p. 93–110, 20 dez. 2019.
LÔBO, I. C. P. D. Eficiência in vitro e in vivo de extratos de duas plantas forrageiras (Gliricidia sepium, acacia mearnsii) sobre nematoides gastrintestinas de caprinos. 2017. Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Maranhão, Maranhão, Brasil.
MACHADO, J.L; ASSUNÇÃO, A.K.; DA SILVA, M.C.; DOS REIS, A.S.; COSTA, G.C.; ARRUDA, D.D.E. S.; ROCHA, B.A.; VAZ, M.M.; PAES, A.M.; GUERRA, R. N; BERRETTA, A.A.; DO NASCIMENTO, F.R. Brazilian green propolis: anti-inflammatory property by an immunomodulatory activity. Evid Based Complement Alternat Med., v.2012, p.157652, 2012. doi: 10.1155/2012/157652
MARCÉN, B.; SOSTRES, C.; LANAS, A. [NSAID and gastrointestinal risk]. Atencion Primaria, v. 48, n. 2, p. 73–76, fev. 2016.
MOSKWA J, NALIWAJKO SK, MARKIEWICZ-ŻUKOWSKA R, GROMKOWSKA-KĘPKA KJ, NOWAKOWSKI P, STRAWA JW, BORAWSKA MH, TOMCZYK M, SOCHA K. Chemical composition of Polish propolis and its antiproliferative effect in combination with Bacopa monnieri on glioblastoma cell lines. Sci Rep., n.3, v.10, s.1, pp.21127, 2020. doi: 10.1038/s41598-020-78014-w.
MELO, A. A. M. DE; MATSUDA, A. H.; ALMEIDA-MURADIAN, L. B. DE. Identidade e qualidade da própolis proveniente de quatro regiões do Brasil. Revista do Instituto Adolfo Lutz, v. 71, n. 3, p. 540–548, 1 mar. 2012.
MOSMANN, T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. Journal of Immunological Methods, v. 65, n. 1–2, p. 55–63, 16 dez. 1983.
NOGUEIRA, Naira de Souza Gomes. Avaliação do efeito do extrato aquoso de própolis sobre a viabilidade de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) e de adenocarcinoma de mama MDA-MB-231 irradiadas com Cobalto-60. 2017. 101 f. Dissertação (Mestrado em Ciência e Tecnologia para Recursos Amazônicos) - Universidade Federal do Amazonas, Itacoatiara, 2017.
NUNES, C. F. et al. Padronização de uma Amostra de Extrato Etanólico de Própolis Verde. Revista Fitos, v. 7, n. 01, p. 67–72, 31 mar. 2012.
OLIVEIRA, K.A.M. et al. Atividade Antimicrobiana e Quantificação de Flavonoides e Fenóis totais em diferentes extratos de Própolis. Semina: Ciências Biológicas e da Saúde. Londrina/PR, v. 33, n. 2, p.211-222, 2012.
OLIVEIRA, J., MOMESSO, L. S. Chemical profile evaluation of comercial samples of propolis from Apis mellifera (brown propolis) and from Baccharis dracunculifolia (green propolis). Congresso de Iniciação Científica da UNIFIO, Ourinhos, São Paulo, Brasil, 2019.
OGAZON, A. T. et al. Prostaglandin E2 Enhances Gap Junctional Intercellular Communication in Clonal Epithelial Cells. International Journal of Molecular Sciences, v. 22, n. 11, p. 5813, 28 maio 2021.
OGBOLE, O. O.; SEGUN, P. A.; ADENIJI, A. J. In vitro cytotoxic activity of medicinal plants from Nigeria ethnomedicine on Rhabdomyosarcoma cancer cell line and HPLC analysis of active extracts. BMC Complementary and Alternative Medicine, v. 17, n. 1, p. 494, 22 nov. 2017.
PAIXÃO, D. R. DA et al. Efeitos da própolis na proliferação de fibroblastos em lesões cutâneas de ratos. Revista de Ciências Farmacêuticas Básica e Aplicada, v. 35, n. 3, 1 jul. 2014.
PEREIRA FAN, BARBOZA JR, VASCONCELOS CC, LOPES AJO, RIBEIRO MNS. Use of Stingless Bee Propolis and Geopropolis against Cancer-A Literature Review of Preclinical Studies. Pharmaceuticals (Basel), n.14, v.14, s.11, pp.1161, 2021. doi: 10.3390/ph14111161.
PERŠURIĆ, Ž. et al. Assessment of the Biological Activity and Phenolic Composition of Ethanol Extracts of Pomegranate (Punica granatum L.) Peels. Molecules, v. 25, n. 24, p. 5916, jan. 2020.
PETER, C. M. et al. Chemical and cytotoxic analyses of three varieties of Brazilian propolis (green propolis, jataí propolis and brown propolis) and its anti-Sporothrix brasiliensis in vitro activity. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 71, p. 819–827, 14 jun. 2019.
RAMESH, K. V.; PADMAVATHI, K. Assessment of Immunomodulatory Activity of Euphorbia hirta L. Indian Journal of Pharmaceutical Sciences, v. 72, n. 5, p. 621–625, set. 2010.
REINKE, J. M.; SORG, H. Wound repair and regeneration. European Surgical Research. Europaische Chirurgische Forschung. Recherches Chirurgicales Europeennes, v. 49, n. 1, p. 35–43, 2012.
RIGHI, A. A. et al. Brazilian red propolis: unreported substances, antioxidant and antimicrobial activities. Journal of the Science of Food and Agriculture, v. 91, n. 13, p. 2363–2370, 2011.
ROSS, E. A.; DEVITT, A.; JOHNSON, J. R. Macrophages: The Good, the Bad, and the Gluttony. Frontiers in Immunology, v. 12, p. 708186, 2021.
SHIAU, I. L. et al. Quantification for saponin from a soapberry (Sapindus mukorossi Gaertn) in cleaning products by a chromatographic and two colorimetric assays. Journal of the Faculty of Agriculture - Kyushu University (Japan), 2009.
SILVA-SILVA, J. V. Estudos Farmacognósticos, Fitoquímicos e Atividade Antileishmania de Espécies Geissospermum (Apocynaceae). 141 f. Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal do Pará, Programa de PósGraduação em Ciências Farmacêuticas, Belém, 2016.
SNYDER, R. J. et al. Macrophages: A review of their role in wound healing and their therapeutic use. Wound Repair and Regeneration, v. 24, n. 4, p. 613–629, 2016.
TOBALDINI-VALERIO, F. K. et al. Propolis: a potential natural product to fight Candida species infections. Future Microbiology, v. 11, n. 8, p. 1035–1046, ago. 2016.
TSUBOY, M. S. et al. In vitro evaluation of the genotoxic activity and apoptosis induction of the extracts of roots and leaves from the medicinal plant Coccoloba mollis (Polygonaceae). Journal of Medicinal Food, v. 13, n. 3, p. 503–508, jun. 2010.
WOŹNIAK, M. et al. The role of seasonality on the chemical composition, antioxidant activity and cytotoxicity of Polish propolis in human erythrocytes. Revista Brasileira de Farmacognosia, v. 29, p. 301–308, 26 ago. 2019.
