Efeito de meios diluidores na congelabilidade do semen canino/ Effect of diluting media on canine semen freezability

Abstract

Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia de dois meios diluentes de congelação, para sêmen canino. Para tanto, foram utilizados 3 machos, adultos, de diferentes raças, com idades entre 2 a 5 anos e fertilidade comprovada. Realizaram-se 4 colheitas de sêmen de cada animal, pelo método de manipulação digital do bulbo peniano, priorizando a segunda fração do ejaculado. As amostras colhidas foram divididas em 2 grupos, com concentração de 80 x 10⁶ espermatozoides por mL. As amostras foram centrifugadas a 600g por 10 minutos e em seguida, o pellet foi ressuspendido em meio de congelação. No grupo 1, foram diluídas em meio de TRIS-gema e no grupo 2, diluídas em meio de congelação comercial Botudog® (Botupharma Biotecnologia Animal). As amostras foram envasadas em palhetas de 0,25 mL na concentração de 40x10⁶ espermatozoides viáveis. Em seguida, as amostras permaneceram por 1 hora em estabilização a 5ºC. Logo após, transferidas para o vapor de nitrogênio durante 20 minutos, e por fim, mergulhadas em nitrogênio e armazenadas em botijão criogênico. As palhetas foram descongeladas a 46ºC por 15 segundos e avaliados os parâmetros de cinética espermática, integridade de membrana plasmática e acrossomal (IMPA, %). Os parâmetros de motilidade total (%), motilidade progressiva (%), velocidade linear progressiva (VSL; µm/s), velocidade média da trajetória (VAP; µm/s), linearidade (%), percentagem de espermatozoides rápidos (%), integridade de membrana plasmática e acrossomal avaliados por citometria de fluxo foram superiores no grupo 2 (TRIS-gema). Desta forma, concluímos que o protocolo de congelação de sêmen canino, utilizando o diluente Botudog® apresenta melhores parâmetros de cinética e viabilidade espermática pós descongelação, quando comparados ao meio TRIS-gema.