Sorologia e diagnóstico molecular em camudongos para detecção de Toxoplasma gondii em um equino no sul da Bahia
DOI:
https://doi.org/10.34188/bjaerv8n1-069Palavras-chave:
bioensaio, PCR, sorologia, toxoplasmose, zoonoseResumo
O objetivo deste estudo foi diagnosticar a presença de Toxoplasma gondii em um cavalo com sintomas neurológicos, através de um bioensaio em camundongos. Fragmentos do cérebro deste cavalo foram seccionados e colocados individualmente em tubos tipo Falcon estéreis de 50 mL com solução salina tamponada com fosfato (PBS) contendo penicilina benzatina (1000 UI/mL) e estreptomicina (100 mg/mL). Amostras do cérebro foram testadas por bioensaio em camundongos na tentativa de isolar o parasita ou o DNA do parasita. Todos os camundongos sobreviveram ao período experimental e foram sacrificados e necropsiados 60 dias após a inoculação. Durante a necrópsia dos camundongos, o sangue foi coletado por via intracardíaca para testes sorológicos e fragmentos do coração, baço, pulmão, cérebro e fígado foram coletadas e colocadas em frascos livres de DNase e RNase, tubos Eppendorf a -20ºC para PCR. Foi realizada uma RIFI para detecção de anticorpos contra T. gondii, as lâminas foram sensibilizadas com taquizoítos da cepa RH. Para amplificação do DNA de T. gondii foi realizada uma PCR e, posteriormente, uma Nested PCR. Um dos camundongos foi soropositivo para T. gondii com títulos de 1:64. Na PCR convencional e na Nested PCR, nenhum dos tecidos do camundongo foram positivos. Conclui-se que cavalos com sintomas neurológicos podem ser fonte de infecção por T. gondii em outras espécies animais, representando assim um risco para outros animais e humanos.
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