Purificación y evaluación de la proteína p25 como antígeno recombinate en la dectección del virus de la artritis encefalitis caprina (AEC)
Purificação e avaliação da proteína p25 do vírus da artrite encefalite caprina (CAE)
DOI:
https://doi.org/10.34188/bjaerv6n3-049Palavras-chave:
Inmunoensayo, estandarización, antígeno p25, detección y diagnósticoResumo
Para emplearse como antígeno en inmunoensayo indirecto, se purificó la proteína p25 recombinante del virus de la artritis encefalitis caprina mediante cromatografía de afinidad a iones metálicos inmovilizados. Se desarrollaron y estandarizaron las mejores condiciones que permitieron su fiabilidad, para después ser validada con un total de 46 muestras positivas y negativas de referencia. Se estableció la concentración de 4 µg/ml como óptima para la sensibilización de las microplacas. La robustez del ELISA se demostró utilizando como diseño el modelo de Youden y Stainer, y aplicando el criterio del comité de Secretaría de Salud. La concordancia respecto a un estuche comercial fue del 71.73 %, en cuanto a la sensibilidad y especificidad fue del 59.37 % y 100 %, respectivamente. Además, no se presentaron reacciones cruzadas para 3 antígenos probados previamente. Por lo tanto, se concluye que el método de ELISA recombinante implementado en este trabajo, es un método excelente, sencillo, barato y específico para el diagnóstico y tamizaje de la artritis encefalitis caprina, ya que disminuye las reacciones cruzadas.
Referências
Ahmad A. A., Chebloune Y., Chatagnon G., Pellerin J L., Fieni F., 2012. Is caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) transmitted vertically to early embryo development stages (morulae or blastocyst) via in vitro infected frozen semen? Theriogenology 77, 1673-1678
Bolanos-García VM & Davies OR. Structural analysis and classification of native proteins from E. coli commonly co-purified by immobilised metal affinity chromatography. England. Biochimica et Biophysica Acta, 2006; Vol. 1760: 1304-1313.
Cantú Covarrubias A., Álvarez Ojeda G. 2015. Situación epidemiológica de algunas enfermedades infecciosas más importantes en explotaciones caprinas de Tamaulipas. Memorias, Toluca, Méx. RNIP, 145-147.
Cruz González Eduardo. 2016. Clonación y expresión de la proteína p25 del Virus Artritis Encefalitis Caprina (VAEC) en el sistema Escherichia coli BL21. Tesis de Químico Farmacéutico Biólogo. Universidad Autónoma de Tamaulipas, Unidad Académica Multidisciplinaria Reynosa-Aztlán. 35 pp.
Kwang J. Keen J., Cutlip RC, et al. 1995. Serological diagnosis of caprine lentivirus infection by recombinant inmmunoassays. Small Rum. Res16:171-177.
Ledezma Torres R., Segura Correa J. C., Chávez Sánchez J. F., Rodríguez García A. J., Cedillo Rosales S., Moreno Degollado G., Avalos Ramírez R. 2022. Factores de riesgo asociados a la seroprevalencia de lentivirus en rebaños ovinos y caprinos del noreste de México. Revista mexicana ciencia pecuaria; 13 (4): 995-1008.
Lima-Feitosa ALV, da Silvia-Teixeira MF, Rizaldo-Pinheiro R, Silva da Cunha RM, Santos-Lima JPM, Andrioli A et al. 2010. Phylogenetic analysis of small ruminant lentiviruses from Northern Brazil. Brazil. Small Ruminant Research, Vol. 94: 205-209.
López Pecina Melina. 2015. Detección del Virus artritis encefalitis caprina por medio de PCR en muestras de sangre de caprinos colectadas en el noreste de México y la clonación de la secuencia codificante de la proteína viral p25 en un sistema de expresión procariota. Tesis de Químico Farmacéutico Biólogo. Universidad Autónoma de Tamaulipas, Unidad Académica Multidisciplinaria Reynosa-Aztlán. 40 pp.
Martínez, R.H.A.; García, R.L.I.; Arcilla, L.T. y Medina, F.E. 2006. Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán. UNAM. Unidad de Investigación Multidisciplinaria en Salud Animal. Edo de México. Celaya, Guanajuato. Grupo Ganadero para la validación y transferencia tecnológica caprina. México.
Murphy B.G., Castillo D., Mete A., Vogel H., Goldsmith D., Barro M., Gonzales-Viera O. 2021. Caprine Arthritis Encephalitis Virus is associated with renal lesions. Viruses, 13, 1051.
Ochoa R, Martínez JC, Ferriol X, García AM, Estrada E, Blanco R et al. Sensibilización de placas para ensayos inmunoenzimáticos con antígenos vacunales. La Habana, Cuba. VacciMonitor, 2001; Vol. 10: 14-17.
Panneum S., Rukkwamsuk T. 2017. Diagnosis of caprine arthritis encephalitis virus infection in dairy goats by ELISA, PCR and viral culture. Polish Journal of Veterinary Sciences, Vol. 20, No 2, 347-353.
Petursson G, Georgsson G, Palsson P. 1990. Maedi-visna virus. In: Dinker Z, Morein B, eds. Virus infections of ruminants. Amsterdam: Elsevier Science Publishers, 431-440. (vol de la revista)
Rowe J. D y East N. E. 1997. Risk Factors for transmission and methods for control of caprine arthritis-encephalitis virus infection. Veterinary clinics of North America: food animal practice. Vol 12. 1.
Sáenz Contreras Manuel Alberto. 2006. Determinación de la presencia del síndrome de Artritis Encefalitis Caprina en granjas semitecnificadas de los departamentos de Guatemala, Santa Rosa, Sololá y Suchitepéquez. Tesis, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad de San Carlos de Guatemala, Guatemala.37 pp.
Sambrook J., Russell D. W. 2001. Molecular Cloning: a laboratory manual. Vol: 3, 3rd ed. Cold spring harbor laboratory press, cold spring harbor, New York.
Tavella A., Bettini A., Ceol M., Zambotto P., Stifter E., Kasstatscher N., Lombardi R., Nardeli S., Beato M. S., Capello K., Bertoni G. 2017. Achievements of an eradication programme against caprine arthritis encephalitis virus in South Tyrol, Italy. Veterinary Record.
Downloads
Publicado
Como Citar
Edição
Seção
Licença
- O conteúdo dos artigos é de responsabilidade exclusiva dos autores.
- É permitida a reprodução total ou parcial do conteúdo dos artigos, desde que citada a fonte.
- Artigos com plágio serão recusados, e o autor do plágio perderá o direito de publicar nesta revista.
- Os nomes e endereços informados nesta revista serão utilizados exclusivamente para os serviços prestados por esta publicação e não estão disponíveis para outros fins ou a terceiros.
- Depois de enviar os artigos, os autores cedem os direitos autorais de seus artigos ao BJAER. Se você se arrepender da submissão, o autor tem o direito de solicitar ao BJAER que não publique seu artigo. Porém, essa solicitação deve ocorrer até dois meses antes da divulgação do número que o artigo será publicado.
- O BJAER usa a licença Creative Commons CC BY. Informações sobre esta licença podem ser encontradas em: https://creativecommons.org/licenses/by/3.0/br/
Brazilian Journal of Animal and Environmental Research (BJAER) se reserva o direito de efetuar nos originais alterações de ordem normativa, ortográfica e gramatical, com vistas a manter o padrão culto da língua, respeitando, porém, o estilo dos autores. Os trabalhos finais não serão enviadas aos autores.