Expressão, Solubilização e Purificação das proteínas NS1 e EDIII recombinantes do DENV-2 produzidas em plataforma bacteriana / Expression, Solubilization and Purification of NS1 and EDIII recombinant proteins of DENV-2 produced on bacterial platform

Authors

  • Danielle Ferreira de Oliveira
  • Tatiane Rodrigues de Oliveira
  • Eduarda Nattaly Ferreira Nobre Santos
  • Cícero Matheus Lima Amaral
  • Bruno Bezerra da Silva
  • Daniel Freire Lima
  • Mario Alberto Maestre Herazo
  • Maria Izabel Florindo Guedes

DOI:

https://doi.org/10.34117/bjdv6n8-075

Keywords:

Dengue, Expressão de proteínas heterólogas, Biotecnologia.

Abstract

O objetivo do presente trabalho foi avaliar a expressão das proteínas recombinantes NS1 e EDIII do DENV-2 produzidas em plataforma bacteriana (Escherichia coli). Bactérias contendo os genes de interesses foram crescidas e induzidas à expressão em diferentes concentrações de IPTG (0,1 mM; 0,5 mM e 1,0 mM), em seguida, foram solubilizadas em solução contendo 8 M de úreia. As proteínas solúveis foram purificadas por cromatografia de afinidade em coluna de resina Ni-NTA e, posteriormente, quantificadas em aparelho de nanodrop. Ao fim, foram obtidos aproximadamente 63 mg/L para ambas as proteínas. Nossos resultados mostraram que é possível expressar proteínas de interesse em sistema procarioto. Entretanto, faz-se necessário expandir a escala de produção dessas proteínas visando utilização em ensaios de imunodiagnósticos.

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Published

2020-08-10

How to Cite

Oliveira, D. F. de, Oliveira, T. R. de, Santos, E. N. F. N., Amaral, C. M. L., Silva, B. B. da, Lima, D. F., Herazo, M. A. M., & Guedes, M. I. F. (2020). Expressão, Solubilização e Purificação das proteínas NS1 e EDIII recombinantes do DENV-2 produzidas em plataforma bacteriana / Expression, Solubilization and Purification of NS1 and EDIII recombinant proteins of DENV-2 produced on bacterial platform. Brazilian Journal of Development, 6(8), 55161–55167. https://doi.org/10.34117/bjdv6n8-075

Issue

Section

Original Papers