Estudo da atividade enzimática da Lactase (β-galactosidase) aplicando planejamento experimental

Abstract

O desenvolvimento tecnológico na área de biomoléculas em conjunto com mudanças de hábitos alimentares, proporcionou a criação de novos produtos alimentícios sendo aplicados na nutrição humana. Dentre estes produtos, destaca-se a enzima β-galactosidase conhecida como Lactase. Neste sentido, o presente trabalho tem como objetivo estudar a eficiência enzimática frente a hidrólise do dissacarídeo lactose utilizando planejamento experimental. O estudo foi realizado nas concentrações de substrato 50, 75 e 100 mg L^-1 de lactose preparadas em soluções tampões de pH 4, 7 e 10. A reação de hidrólise da lactose foi realizada com a adição da enzima Latase comercial na solução contendo o substrato em uma proporção de 30% de massa da lactose em solução. A reação ocorreu em um béquer (100 mL) com auxílio de um agitador magnético (500 rpm) à temperatura (22±2° C). Além disso, a glicose foi determinada por análise de método enzimático-colorimétrico (Glicose-PP; Analisa). Dessa forma, foram realizados 11 experimentos obtendo valores que possibilitaram verificar que a maior porcentagem de hidrólise da lactose, ocorreu no pH 4. Ambas as concentrações de substrato (50 e 100 mg L^-1) foram obtidos 10,4 e 20,7 % hidrólise da lactose em 90 minutos. Em contrapartida, no pH 10 a porcentagem obtida foi de 2,2 e 4,0 % de hidrólise da lactose em 90 minutos. Neste contexto, o estudo realizado com o planejamento experimental proporcionou a avaliação da interação entre a concentração de lactose e o pH 4 com efeito antagonista. Entretanto, o pH mostrou ser o fator determinante para a eficiência enzimática da lactase.