Análise molecular de ácidos nucléicos a partir de tecidos tumorais prostáticos parafinizados

Abstract

As amostras de tecido humano obtidas de procedimentos cirúrgicos são rotineiramente fixadas em formalina e embebidas em parafina para arquivamento em longo prazo, sendo assim, a maioria dos laboratórios possuem grandes arquivos de blocos de parafina. Esses arquivos representam uma importante fonte de material para estudos retrospectivos. O estudo de tecidos parafinizados tem vantagem, por exemplo, sobre os congelados, pois os primeiros preservam uma qualidade morfológica superior e permite análises retrospectivas, além de numerosos, facilmente disponíveis e permitirem, em cortes seriados, a identificação de lesões precursoras de tumores invasivos. O objetivo deste estudo foi otimizar um protocolo de extração do RNA de fragmentos de tecidos tumorais de próstatas, contendo hiperplasia e adenocarcinoma, fixados em formol e conservados em blocos de parafina. Em seguida, a qualidade do RNA extraído foi avaliada mediante a amplificação por PCR do exon 4 do gene TP53, onde se observa um polimorfismo no códon 72 muito relacionado com processos cancerígenos em vários órgãos. Os resultados obtidos demonstraram que foi possível aperfeiçoar um protocolo para detecção do RNA a partir de tecidos tumorais de próstatas parafinizados, sem utilizar inibidores de RNAse usualmente empregados em semelhantes protocolos.