Metodologia de identificação molecular de Sclerotinia sclerotiorum em sementes de soja / Methodology for molecular identification of Sclerotinia sclerotiorum in soybean seeds

Resumo

As sementes são o principal meio de disseminação de Sclerotinia sclerotiorum, um importante patógeno na cultura da soja. A correta detecção deste fitopatógeno é de suma importância para traçar medidas preventivas ou curativas no controle da doença, assim como, para certificação dos lotes de sementes para comercialização. Existem alguns métodos de detecção de S. sclorotiorum, no entanto, estes são lentos e pouco precisos. Métodos baseados em genética molecular tem sido utilizado para este fim em vários microrganismos fitopatogênicos. Desta forma, este trabalho consiste na elaboração de uma metodologia de detecção de S. sclerotiorum através de Nested-PCR em lotes de sementes de soja. Para isto o DNA do patógeno foi obtido a partir da centrifugação de um pequeno volume de solução de água com sementes, o pellet formado foi ressuspendido em água ultrapura estéril, a partir deste, procedeu-se a extração de DNA. Realizou-se a reação de Nested-PCR com primers específicos para identificação de S. sclerotiorum. Foi possível verificar que a detecção molecular de S. sclerotiorum, em sementes de soja, assim como para sementes de feijão (dados não publicados) mostrou-se como um método rápido, sensível e de fácil execução. Adicionalmente, comprovou-se a maior confiabilidade do mesmo em relação ao método morfológico.